바나나에서 DNA를 추출하는 방법

이것은 식물 유전 물질을 추출하고 현미경으로 관찰할 수 있는 가장 널리 알려진 공정 중 하나입니다. 토마토, 패션 프루트 또는 기타 과일로 만들 수도 있습니다. 이 경우 바나나를 사용했는데, 취급 방법이 간단하고 실험에서 바나나를 부수는 데 필요한 몇 가지 단계 때문입니다.

질경이 또는 바나나에서 DNA를 추출하려면 다음이 필요합니다.

• 질경이 또는 바나나.
• 매우 날카로운 칼.
• 포크나 감자 으깨는 기구.
• 액체 세제 또는 세탁 비누.
• 광천수.
• 약간의 소금.
• 탄산 수소 나트륨.
• 깔때기.
• 키친 페이퍼 또는 페이퍼 필터.
• 아주 차가운 알코올.
• 단계를 수행하기 위한 모든 재료의 용기. 하나는 으깬 바나나에, 다른 하나는 비누와 나트륨에 필요합니다. 외부에서 내용물이 잘 보이는 투명한 용기에 최종 믹스를 하시면 도움이 됩니다.
• 유리 또는 플라스틱 빨대, 바람직하게는 투명합니다. 또는 훅 포인트가 있는 뜨개질 바늘을 손에 들고 있는 것도 좋은 생각입니다.

과일을 으깨기 위해 오염될 수 있는 도구를 사용하지 마십시오. 예를 들어, 치즈 강판은 사용 시 지방 흔적이 있을 수 있으며 이러한 지방이 최종 샘플을 오염시키는 것을 원하지 않습니다.

단계

• 첫 번째 단계는 바나나를 작은 조각으로 자르는 것입니다. 다음으로 바나나를 으깨서 퓌레로 만드는 것이 편리합니다. 이렇게 함으로써 당신은 DNA를 포함하고 있는 이 과일의 세포를 파괴하게 될 것입니다.
• 세포가 일반적으로 지질막으로 덮여 있다는 점을 고려하면 세포를 더 철저하게 부술 수 있는 추가 방법이 필요합니다. 이를 위해 다음 단계에서는 별도의 컨테이너에 솔루션을 만듭니다. 이 용액은 종종 화학 학계에서 lysis buffer라고 불립니다.

용해 버퍼를 만들려면 액체 또는 세탁 비누와 생수 한 컵을 가져와 희석해야 합니다. 액체라면 두 번 분사하면 물을 채색하기에 충분합니다. 가루 세제라면 한 스푼 정도면 충분합니다.

세제는 지질(지방의 일종)과 지질에 용해되는 단백질(필수 다량 영양소의 일종)을 끌어당기는 기능을 수행합니다. 또한 이 혼합물에 소금 2티스푼과 베이킹 소다 6티스푼을 추가해야 합니다. 이 두 화합물의 나트륨은 양이온과 함께 DNA를 구성하는 가닥의 무결성을 촉진합니다. 특히 중탄산염은 DNA가 손상되는 것을 방지하기 위해 용액의 pH를 중화시키는 역할을 합니다. DNA 가닥은 이제 그들을 덮는 데 사용되는 지질이 제거되었기 때문에 보호되지 않습니다.

• 이제 물리적 분리 방법을 사용하겠습니다. 우리가 해야 할 일은 1단계에서 추출한 생물학적 물질을 세제 용액에 추가하는 것입니다. 우리는 4테이블스푼을 취해 최소 3분, 최대 5분 동안 혼합합니다.

키친 페이퍼나 ​​커피 필터를 기본 필터로 사용하고 깔때기의 도움을 받아 이 필터 중 하나를 깔때기에 넣고 혼합물의 액체를 용기에 붓습니다. 이 혼합물에서 최종적으로 관찰할 DNA 샘플을 추출할 것입니다. 

이 시점에서 우리는 수성 단계에서 우리의 솔루션을 갖게 될 것이고 유전 물질을 쉽게 수집할 수 있습니다. 용액에는 RNA, DNA 및 물에 용해되는 일부 단백질이 포함되어 있습니다.

화학적 분리

이제 우리가 분리할 생물학적 물질의 분자의 화학적 특성을 이용하여 화학적 분리 방법을 설명하겠습니다. 방금 여과한 용액 5ml를 사용합니다. 부피가 3배가 되는 차가운 알코올 양(이 경우 15ml)과 혼합합니다. 알코올의 차가운 온도는 방법의 더 나은 성능을 보장합니다. DNA를 포함하는 생물학적 용액의 일부는 알코올에 용해되지 않기 때문에 우리는 그것이 어떻게 응집되고 다른 요소들과 분리되어 육안으로 쉽게 알아볼 수 있는 층을 형성하는지 볼 것입니다.

알코올을 천천히 첨가해야 한다는 점을 고려하는 것이 중요합니다. 바람직하게는 수용액이 대기 중인 용기의 가장자리를 따라 알코올을 밀어넣는 것이 좋습니다. 우리는 또한 DNA를 손상시키지 않으려고 노력하고 있습니다. 나중에 현미경으로 살펴보고 싶을 수도 있습니다.

이제 샘플의 DNA를 운반하는 흐린 용액을 구별할 수 있으므로 수성 매체에서 추출을 진행합니다. 빨대를 가져다가 이전에 준비된 용액에 닿을 때까지 수성 매체에 넣습니다. 그 직후 빨대의 바깥 쪽 끝을 손가락으로 덮어 공기 누출을 막고 용액을 담는 역할을 합니다. 용액이 빨대 끝에 달라붙지 않으면 다른 쪽 끝에서 손가락을 떼지 않고 용액을 추출하고 이 과정을 반복하여 빨대가 적어도 눈에 띄게 포함된 밀도가 높은 매체에 들어갔는지 확인합니다. 재료 유전. 우리는 반대쪽 끝에 손가락을 대고 잘 덮고 천천히 빨대를 바깥쪽으로 움직이면서 수용액에서이 배지를 조금씩 추출합니다.

이 마지막 솔루션을 잡기가 어려울 것 같으므로 이전 방법으로 성공하지 못하면 후크 포인트가 아래쪽으로 향하는 뜨개질 바늘을 사용하여 수성 매체에서 용액의 이 두꺼운 부분을 추출할 수 있습니다.

이제 현미경으로 볼 수 있는 식물 DNA 솔루션이 준비되었습니다. 오염을 방지하기 위해 페트리 접시 또는 이와 유사한 도구에 즉시 두는 것이 좋습니다.

참조

교육 및 창조. (s/f). 식물에서 DNA를 추출하는 방법? 이용 가능: https://www.educaycrea.com/2015/09/como-extraer-el-adn-de-un-vegetal/

오초아, J. (2010). 주방재료로 DNA추출. 이용 가능: https://www.youtube.com/watch?v=PkjtFM_UVxk&t=243s