バナナからDNAを抽出する方法

これは、植物の遺伝物質を抽出し、顕微鏡で観察できるようにする最も一般的に知られているプロセスの 1 つです。トマト、パッションフルーツ、その他の果物でも作ることができます。この場合、バナナを使用します。これは、取り扱いが簡単で、実験でバナナをつぶすのに必要な手順が少ないためです。

オオバコまたはバナナから DNA を抽出するには、次のものが必要です。

• オオバコまたはバナナ。
• 非常に鋭いナイフ。
• フォークまたはポテトマッシャー。
• 液体洗剤または洗濯石鹸。
• ミネラルウォーター。
• 塩少々。
• 重炭酸ナトリウム。
• 漏斗。
• キッチンペーパーやペーパーフィルター。
• 非常に冷たいアルコール。
• ステップを実行するための任意の材料のコンテナ。1つはつぶしたバナナ用、もう1つは石けんとナトリウム用です。最終的な混合物は、外側から中身が確認しやすい透明な容器で作ると便利です。
• ガラス製またはプラスチック製のストロー、できれば透明なもの。または、フックポイント付きの編み針を手元に用意しておくとよいでしょう。

果物をつぶすために汚染される可能性のある道具を使用しないように注意してください. たとえば、チーズおろし金は、使用時に微量の脂肪が残る可能性がありますが、これらが最終サンプルに混入することは望ましくありません。

手順

• 最初のステップは、バナナを細かく切ることです。次にバナナを潰してピューレ状にすると便利です。これを行うことで、DNA を含むこの果実の細胞を壊すことになります。
• 細胞は一般に脂質膜で覆われていることを考慮すると、細胞をより完全に破壊するための追加の方法が必要になります。このため、次のステップでは、別のコンテナーでソリューションを作成します。このソリューションは、学術化学界では溶解バッファーと呼ばれることがよくあります。

溶解緩衝液を作るには、液体または洗濯石鹸とミネラルウォーター1カップを取り、それを希釈する必要があります. 液体の場合、水を着色するには 2 回噴射するだけで十分です。粉末洗剤なら大さじ山盛りで十分です。

界面活性剤は、脂質（脂肪の一種）と脂質に溶けるタンパク質（必須多量栄養素の一種）を引きずる機能を果たします。また、この混合物に小さじ2杯の塩と小さじ6杯の重曹を加えなければなりません。これら 2 つの化合物に含まれるナトリウムは、その陽イオンとともに、DNA を構成する鎖の完全性を促進します。特に重炭酸塩は、DNA が損傷するのを防ぐために、溶液の pH を中和する役割を果たします。DNA鎖は、コーティングに使用されていた脂質が取り除かれているため、保護されていません.

• ここで、物理的な分離方法に頼ります。必要なのは、ステップ 1 で抽出した生物学的物質を洗剤溶液に追加することです。大さじ 4 杯を取り、少なくとも 3 分間、最大で 5 分間混合します。

キッチンペーパーまたはコーヒーフィルターを基本的なフィルターとして使用し、漏斗を使用して、これらのフィルターの1つを漏斗に配置し、混合物の液体を容器に注ぎます. この混合物から、観察する DNA サンプルを最終的に抽出します。 

この時点で、溶液は水相になり、遺伝物質を簡単に収集できます。溶液には、RNA、DNA、および水に溶けるいくつかのタンパク質が含まれています。

化学分離

ここでは、分離する生体物質の分子の化学的性質を利用した化学的分離法について説明します。ろ過したばかりの溶液 5 ml を使用します。体積が3倍になる量の冷たいアルコール、この場合は15mlと混ぜます。アルコールの低温は、メソッドのより良いパフォーマンスを保証します。DNAを含む生物学的溶液の一部はアルコールに溶けないため、それがどのように凝集して他の要素から分離し、肉眼で容易に認識できる層を形成するかを確認します.

アルコールはゆっくりと添加する必要があることを考慮することが重要です。できれば、水溶液が待機している容器の端に沿ってアルコールをスライドさせます。また、後で顕微鏡で見たいと思うかもしれない DNA を損傷しないようにしています。

サンプルの DNA を含む濁った溶液を識別できるようになったので、水性媒体から DNA を抽出します。ストローを取り、事前に調製した溶液に触れるまで水性媒体に入れます。その直後、ストローの外側の端を指で覆い、空気の漏れを覆い、溶液を保持するのに役立ちます. 溶液をストローの先端に付着させることができない場合は、もう一方の端から指を離さずに溶液を取り出し、このプロセスを繰り返します。素材、遺伝。反対側の端に指を置き、しっかりと覆い、ストローをゆっくりと外側に動かしながら、水溶液からこの媒体を少しずつ抽出しようとします。

この最後の溶液を捕まえるのに苦労する可能性が高いので、前の方法でうまくいかない場合は、フックポイントを下に向けた編み針を使用して、水性媒体から溶液のこの厚い部分を抽出することができます.

これで、植物 DNA 溶液を顕微鏡で見る準備ができました。汚染を避けるために、すぐにペトリ皿または同様の器具に入れることをお勧めします。

参考文献

教育し、作成します。(s/f)。植物からDNAを抽出するには？入手可能: https://www.educaycrea.com/2015/09/como-extraer-el-adn-de-un-vegetal/

Ochoa、J.（2010）。キッチン素材でDNA抽出。利用可能: https://www.youtube.com/watch?v=PkjtFM_UVxk&t=243s